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錢經理與您探討如何巧妙利用血清培養細胞
點擊次數:205 發布時間:2018-10-17

    在細胞培養實驗室中,血清是常見的科研試劑之一,常見的血清種屬有人的和動物兩種,而動物的又分為牛、豬、雞、羊等,根據客戶對產品種屬與來源的選擇,價格也是不同的。對于實驗新手來說,稍有不慎就會影響到實驗結果,甚至讓花費幾千元買來的血清失去效果。那么我們要如何正確的使用與操作呢?今天上海恒遠錢經理與您探討“如何巧妙利用血清培養細胞”。


    我們今天要說的血管平滑肌細胞培養采用的是貼塊法,這種方法具有獲得平滑肌細胞純度高,量多,操作簡便的優點。但用貼塊法易使平滑肌細胞胞質內肌絲喪失,亞細胞器增加。 
        
    操作方法:動物經頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開血管,刮除內膜即內皮細胞迅速撕下中膜內、中層,切成約1mm寬的小條,浸泡在含血清的Hank's液中,并將撕下小組織塊種植于培養瓶壁。置于37℃恒溫箱,2h左右,取出培養瓶加入20%胎牛血清的培養液,再放回培養箱內靜止培養4天。4天后可見細胞從組織中遷移游出。


    在這方法中,大家可要注意啦!不同動物血管結構有差異,豬和猴較易操作,但小動物如兔、鼠因其血管小,血管壁薄等特點,使之難以分離。另外組織塊太薄,不易粘附培養基,也使細胞較難生長。


上海恒遠特別提示,實驗中請注意:
1. 根據培養細胞的種屬加入適量的不同血清,一般可加入胎牛血清,若小牛血清增殖效果差,應加胎牛血清(FBS),通常濃度為10%~20%。
2. 培養基的選擇:常用的有DMEM,M199培養基。培養兔的平滑肌細胞用DMEM效果較好。
3. 種植組織塊的數目,如75cm2的長頸瓶組織塊不得少于30。 

 

    上海恒遠是國內知名高品質血清供應商,提供GIBCO、HyClone、NQBB、SIGMA等品牌血清產品,保證,保證質量!咨詢采購,歡迎您聯系我公司業務員。

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